26swdgu10 10.3205/26swdgu10 urn:nbn:de:0183-26swdgu105 Meeting Abstract Mink Mink Jan J

Universität des Saarlandes, Klinik für Urologie und Kinderurologie, Homburg, Deutschland Universitätsklinikum Bonn, Institut für Experimentelle Onkologie, Bonn, Deutschland

author Tan Tan E. E

Universitätsklinikum Bonn, Institut für Experimentelle Onkologie, Bonn, Deutschland

author Schneppenheim Schneppenheim F. F

Universitätsklinikum Bonn, Institut für Experimentelle Onkologie, Bonn, Deutschland

author Linxweiler Linxweiler J. J

Universitätsklinikum Bonn, Institut für Experimentelle Onkologie, Bonn, Deutschland

author Lohse Lohse S. S

Universität des Saarlandes, Institut für Virologie, Homburg, Deutschland

author Eckstein Eckstein M. M

Universität Erlangen-Nürnberg, Institut für Pathologie, Erlangen, Deutschland

author Kalthoff Kalthoff H. H

Universität Kiel, Institut für Experimentelle Krebsforschung, Kiel, Deutschland

author Naumann Naumann C.M. CM

Marienhaus-Klinikum St. Elisabeth, Klinik für Urologie und Kinderurologie, Neuwied, Deutschland

author Klümper Klümper N. N

Universitätsklinikum Bonn, Institut für Experimentelle Onkologie, Bonn, Deutschland Universitätsklinikum Bonn, Klinik für Urologie und Kinderurologie, Bonn, Deutschland

author Junker Junker K. K

Universität des Saarlandes, Klinik für Urologie und Kinderurologie, Homburg, Deutschland

author Hölzel Hölzel M. M

Universitätsklinikum Bonn, Institut für Experimentelle Onkologie, Bonn, Deutschland

author German Medical Science GMS Publishing House

Düsseldorf

610 20260610 germ This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution 4.0 License. Dieser Artikel ist ein Open-Access-Artikel und steht unter den Lizenzbedingungen der Creative Commons Attribution 4.0 License (Namensnennung). M0649 10 Südwestdeutsche Gesellschaft für Urologie e.V. 66. Jahrestagung der Südwestdeutschen Gesellschaft für Urologie e.V. Vortragssitzung 2: Urologische Forschung Koblenz 20260610 20260613 V2.2 TextEinleitung: Das Peniskarzinom ist eine seltene maligne Erkrankung mit limitierten therapeutischen Optionen im lokal fortgeschrittenen oder metastasierten Stadium. Antikörper-Wirkstoff-Konjugate (ADCs) wie Enfortumab Vedotin (EV; gegen Nectin-4 gerichtet) und Sacituzumab Govitecan (SG; gegen Trop-2 gerichtet) haben in anderen Tumorentitäten signifikante Überlebensvorteile gezeigt. Während Trop-2 in nahezu allen Peniskarzinomen überexprimiert ist, findet sich eine Nectin-4-Überexpression nur in etwa einem Viertel der Fälle. Daten zur Wirksamkeit beider Substanzen beim Peniskarzinom liegen bislang nicht vor. Ziel dieser Studie war die systematische Untersuchung der in-vitro-Wirksamkeit von EV und SG sowie die Analyse der Zielantigen-Abhängigkeit des Therapieansprechens.Methode: Fünf primäre Peniskarzinom-Zelllinien (vier aus Primärtumoren, davon drei HPV-negativ und eine HPV-positiv, sowie eine HPV-positive Lymphknotenmetastase) wurden hinsichtlich der Expression von Nectin-4 und Trop-2 mittels Western Blot und Durchflusszytometrie analysiert. Die zytotoxischen Effekte von EV und SG wurden konzentrations- und zeitabhängig mittels Crystal-Violet-Assay bestimmt. Zur Untersuchung der Zielantigen-Abhängigkeit wurden in einer Zelllinie CRISPR/Cas9-vermittelte Knockouts von Trop-2 und Nectin-4 mit mehreren Guide-Sequenzen generiert. Die Validierung erfolgte durch Durchflusszytometrie und genomische miSeq-Analyse.Ergebnisse: Trop-2 wies in allen untersuchten Zelllinien eine hohe Expression auf. Nectin-4 war in einer Zelllinie stark, in drei moderat und in der metastatischen Zelllinie kaum exprimiert. Die Nectin-4-hoch exprimierende Zelllinie hatte unter EV eine Reduktion der Zellviabilität von bis zu 70%. Zelllinien mit intermediärer Expression wiesen ebenfalls eine deutliche Reduktion auf, während die Nectin-4-negative Linie nahezu vollständig resistent war. Alle Zelllinien sprachen auf SG an: HPV-negative Zelllinien hatten bei hohen Konzentrationen eine Viabilitätsreduktion bis zu 70%, HPV-positive Zelllinien bereits bei niedriger Dosis (1 µg/ml) bis zu 80%. Die FACS-Analysen der mittels CRISPR/Cas9 generierten Knockout-Kulturen bestätigten einen nahezu vollständigen Verlust der membranösen Zielantigenexpression; miSeq-Analysen belegten auf Genomebene erfolgreiche Knockouts in bis zu 81% (Nectin-4) bzw. 94% (Trop-2) der Zellen. Die Sensitivität gegenüber EV und SG war in beiden Knockout-Zelllinien hochsignifikant vermindert (p < 0,001).Schlussfolgerung: Die vorliegende Arbeit liefert erstmals Evidenz für eine zielantigenabhängige in-vitro-Wirksamkeit von EV und SG beim Peniskarzinom. Beide ADCs stellen vielversprechende therapeutische Kandidaten dar. Aufgrund der Zielabhängigkeit erscheint eine Bestimmung der Nectin-4-Expression vor EV-Therapie sinnvoll, während SG aufgrund der konsistenten Trop-2-Expression breit einsetzbar sein könnte. Weitere in-vivo- und klinische Studien sind erforderlich, um das therapeutische Potenzial beider Substanzen zu validieren. 0 0 0 0