26rg26 10.3205/26rg26 urn:nbn:de:0183-26rg265 Meeting Abstract Fleischer Fleischer Johannes Robert JR

Freiburg i. Br.

author Schwämmle Schwämmle M.E. ME

Freiburg i. Br. Fakultät für Biologie, Albert-Ludwigs-Universität Freiburg

author Jung Jung M. M

Freiburg i. Br.

author Arnold Arnold J. J

Medizinische Klinik II, Gastroenterologie, Hepatologie, Endokrinologie und Infektiologie, Freiburg

author Schlunck Schlunck G. G

Freiburg i. Br.

author Agostini Agostini H. H

Freiburg i. Br.

author Bucher Bucher F. F

Freiburg i. Br.

author German Medical Science GMS Publishing House

Düsseldorf

610 20260910 germ This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution 4.0 License. Dieser Artikel ist ein Open-Access-Artikel und steht unter den Lizenzbedingungen der Creative Commons Attribution 4.0 License (Namensnennung). M0658 26 Retinologische Gesellschaft 38. Jahrestagung der Retinologischen Gesellschaft Postersitzung & Apero Badenweiler 20260703 20260704 26rg26 TextZiele: Erhöhte Interleukin-6 (IL-6) Spiegel wurden im Glaskörper von Patienten mit proliferativer diabetischer Retinopathie (PDR) vielfach in Studien beobachtet. Eigene Vorarbeiten zeigen, dass bei diesen Patienten zusätzlich auch der lösliche IL-6-Rezeptor (sIL-6R) im Glaskörper signifikant vermehrt ist. Ziel dieser Arbeit ist es die Wirkung von IL6 in Gegenwart von sIL-6R auf die Netzhaut im Kontext eines Mausmodells für vasoproliferative Gefäßerkrankungen mittels Einzelzell-RNA-Sequenzierung (scRNA Seq) zu untersuchen.Methoden: Im Modell der Sauerstoff-induzierten Retinopathie (OIR-Modell) erhielten Mäuse am postnatalen Tag 12 (P12) intravitreale Injektionen von IL6 (100ng/ml) + sIL6R (200ng/ml) oder wirkstoffreier Trägerlösung (N=3 pro Gruppe). 24h später erfolgte die Versuchsauswertung. Die Netzhäute beider Augen einer Maus wurden gemeinsam bis auf Einzelzellniveau verdaut und mit Hashing-Antikörpern sowie Fluoreszenz-Antikörpern zur Detektion von Müller-Zellen (GLAST1) und Endothelzellen (CD31) markiert. Anschließend erfolgte eine selektive Anreicherung von Endothelzellen sowie Müller-Gliazellen mittels Durchflusszytometrie. Alle weiteren Zellpopulationen wurden unverändert zusammen mit den angereicherten Populationen mittels 10x-Genomics-Droplet-Sequenzierung zur RNA-Library aufgearbeitet und sequenziert. Die anschließende Datenanalyse erfolgte mittels R unter Verwendung der Seurat-Pipeline.Ergebnisse: Das MHC-I-basierte Antikörper-Hashing erwies sich in retinalem Gewebe nur eingeschränkt anwendbar und zeigte insbesondere bei neuronalen Zellpopulationen und Photorezeptoren eine limitierte Signalqualität aufgrund niedriger basaler MHC-I- Expression. In der Einzelzell-Analyse zeigte sich in der IL6 + sIL6R- behandelten Gruppe eine relative Anreicherung von Müller-Gliazellen und immunassoziierter Zellpopulationen, insbesondere Mikroglia sowie gewebsständigen Monozyten. Demgegenüber fanden sich in der Kontrollgruppe relativ vermehrt Perizyten-Subpopulationen, darunter proliferierende sowie regulative, sogenannte „ensheathing“ Perizyten, die typischerweise mit vaskulärer Stabilisierung und Gefäßreifung assoziiert sind.Die detaillierte funktionelle Charakterisierung sowie die möglichen Interaktionen zwischen der beobachteten Müller-Glia-Vermehrung und den immunmodulatorischen Zellpopulationen sind Gegenstand laufender Analysen und zum Zeitpunkt der Abstract Einreichung noch nicht vollständig ausgewertet.Schlussfolgerung: Die kombinierte Stimulation durch IL-6 und sIL-6R führt im OIR-Modell zu einer verstärkten Aktivierung retinaler Immunzellpopulationen. Gleichzeitig zeigt sich eine relative Reduktion proliferierender sowie gefäßstabilisierender Perizyten-Subpopulationen. Diese Veränderungen könnten zu einer veränderten Gefäßreifung beitragen und das Gefäßwachstum begünstigen. Die Ergebnisse liefern Hinweise auf einen möglichen Zusammenhang zwischen IL-6-vermittelten Entzündungsprozessen und perizytenabhängiger Regulation der retinalen Angiogenese. 0 0 0 0